产品货号：
YT468
中文名称：
C端YFP标签融合蛋白质粒
英文名称：
C-YFP plasmid(with CMV promoter)
产品规格：
1μg|100μg
发货周期：
1～3天
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pCMV-C-YFP是哺乳动物细胞表达质粒，用于表达C端含YFP(黄色荧光蛋白)标签的融合蛋白。该质粒含有CMV启动子，可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达。在多克隆位点的后面有一个YFP的完整编码序列，因此在多克隆位点根据阅读框插入目的基因就可以表达C端含有YFP标签的融合蛋白。利用YFP的荧光特性可以比较容易地观察融合蛋白表达水平和细胞内定位，也可以利用YFP抗体来检测或免疫沉淀融合蛋白。YFP与GFP高度相似，可尝试用GFP抗体检测YFP。该质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后，可以使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
| 组分 | 1μg | 100μg |
| pCMV-C-YFP | 1μg | 100μg |
| 说明书 | 1份 | 1份 |
保存：-20℃
| Feature Nucleotide | Position |
| CMV promoter | 1-602 |
| T3 promoter and T3 primer binding site | 620-639 |
| Multiple cloning site | 651-740 |
| YFP | 741-1460 |
| T7 promoter and T7 primer binding site | 1510-1531 |
| SV40 polyAsignal | 1543-1926 |
| f1 origin of ss-DNA replication | 2064-2370 |
| bla promoter | 2395-2519 |
| SV40 promoter | 2539-2877 |
| Neomycin/kanamycin resistance ORF | 2912-3703 |
| HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal | 3704-4162 |
| pUC origin | 4291-4958 |
pCMV-C-YFP的多克隆位点的详细图谱如下：
- pCMV-C-YFP中没有的酶切位点包括：
AclI AfeI AflII AgeI AhdI AscI AsiSI BaeI BbsI BbvCI BlpI BmgBI BsiWI BsmBI BspEI BspQI BssHII BstEII BstZ17I EarI EcoNI FseI NruI PflMI PmeI PmlI PpuMI PshAI PspXI SapI SbfI ScaI SgrAI SpeI SwaI XcmI XmnI - pCMV-C-mCherry中的单酶切位点包括：
NdeI CA`TA,TG 240 PspOMI G`GGCC,C 1461 SnaBI TAC|GTA 346 ApaI G,GGCC`C 1461 CspCI ,NN`(N)11CAA(N)5GTGG(N)10,NN` 380 PvuI CG,AT`CG 1541 NheI G`CTAG,C 597 BclI T`GATC,A 1697 BmtI G,CTAG`C 597 MfeI C`AATT,G 1790 SacI G,AGCT`C 651 HpaI GTT|AAC 1803 Eco53kI GAG|CTC 653 MluI A`CGCG,T 1926 BstXI CCAN,NNNN`NTGG 659 BsaXI ,NNN`(N)9AC(N)5CTCC(N)7,NNN` 2087 SacII CC,GC`GG 660 DraIII CAC,NNN`GTG 2153 NotI GC`GGCC,GC 668 SfiI GGCCN,NNN`NGGCC 2812 TspMI C`CCGG,G 680 StuI AGG|CCT 2861 XmaI C`CCGG,G 680 ClaI AT`CG,AT 2880 SmaI CCC|GGG 682 BspDI AT`CG,AT 2880 BamHI G`GATC,C 687 KasI G`GCGC,C 3039 HindIII A`AGCT,T 693 NarI GG`CG,CC 3040 PstI C,TGCA`G 699 SfoI GGC|GCC 3041 EcoRI G`AATT,C 705 PluTI G,GCGC`C 3039 EcoRV GAT|ATC 713 MscI TGG|CCA 3122 SalI G`TCGA,C 717 Tth111I GACN`N,NGTC 3158 AccI GT`MK,AC 718 PflFI GACN`N,NGTC 3158 BglII A`GATC,T 723 BsrDI GCAATG,NN` 3271 XhoI C`TCGA,G 729 RsrII CG`GWC,CG 3556 PaeR7I C`TCGA,G 729 BstBI TT`CG,AA 3722 XbaI T`CTAG,A 735 BsaI GGTCTCN`NNNN, 4029 BcgI ,NN`(N)10CGA(N)6TGC(N)10,NN` 829 ApaLI G`TGCA,C 4644 BsrGI T`GTAC,A 1450 PciI A`CATG,T 4958
pCMV-C-YFP质粒中推荐使用的测序引物序列如下：
T3 primer (620-639):5'-AATTAACCCTCACTAAAGGG-3'
C-YFP primer (852-873):5'- GGGTCAGCTTGCCGTAGGTGGC -3'
图1.pCMV-C-YFP质粒转染细胞后的表达效果图。左侧为明场照片，右侧为荧光照片。
- 本质粒未经我公司书面许可不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
- 本制品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
- 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
- 首次使用1μg包装的本制品时，请先取少量本质粒转化大肠杆菌，进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定，或通过测序进行鉴定。
- 100μg包装的本制品质粒浓度为0.1μg/μL，共1mL。可以直接用于酶切或者转染细胞。
- pCMV-C-YFP质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因，构建的质粒可以用常规方法转染细胞。
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